培养基配制完成后,为什么必须立即灭菌?若不能及时灭菌应如何处理
培养基配制完成后，必须立即灭菌原因是防止细菌污染培养基。一旦细菌污染了培养基，由于培养基有丰富的营养物质，细菌会段时间内大量产生，就会跟培养物争夺营养物质，另一方面，细菌生长过程中会产生有毒物质致使培养物死亡，若不能即时灭菌必须重新进行无菌无毒操作。一般在比较成熟的情况下，会在培养基高压蒸汽灭菌前调高一定的pH值，以便适应灭菌后pH值下降的问题，具体调高多少可根据自身实验摸索。扩展资料：分装时要掌握好分注量，多了即浪费又减小培养物的生长空间;少了又会因营养不足而影响生长，一般以占培养容器1/4-1/3左右为宜，培养基在培养容器中的厚度约为1.5cm。分装时要注意不要将培养基沾到管壁上，以免引起污染。分装后立即塞上棉塞或者盖上瓶盖或封好封口膜，并在培养瓶上贴标签或用记号笔在瓶壁上作好标注，然后进行灭菌。
培养基灭菌前通常采用什么方法？
培养基的灭菌方法 1、高压蒸汽灭菌：高压蒸汽灭菌适合于耐高温培养基、接种器械和蒸馏水的灭菌。培养基在爱制备过程中混入各种杂菌，分装后应立即灭菌，至少应在24h内完成灭菌工作。灭菌时一般是在0.105MPa压力下，温度121℃时，灭菌15~30min即可。消毒时间不宜过长，也不能超过规定的压力范围，否则有机物质特别是维生素类物质就会在高温下分解，失去营养作用，也会使培养基变质、变色，甚至难以凝固。将蒸馏水或自来水装在三角瓶中，装水量一般不超过瓶的2/3，用牛皮纸或硫酸纸包扎封口，然后放入高压锅中灭菌后即为无菌水。 灭菌后的培养基可放到培养室中预培养3d，若无污染现象，则证明灭菌是彻底的，可以使用。暂时不用的培养基最好置于10℃下保存。含IAA或GA3的培养基应在1周内用完，其他培养基最多也不要超过1个月。2、过滤灭菌：一些植物生长调节剂及有机物，如IAA、GA3、ZT、CM等，遇热容易分解，不能与培养基一起进行高温灭菌，而要使用细菌过滤器滤去其中的杂菌。细菌过滤器与滤膜（孔径0.45微米）使用之前要先进行高压灭菌。过滤后的溶液要立即加入培养基中，若为液体培养基，可在培养基冷却至30℃时加入；若为固体培养基，必须在培养基凝固之前（50-60℃）加入，振荡使溶液与其他成分混合均匀。
